RESUMO
OBJECTIVE@#To identify the causative variants in 13 Chinese pedigrees affected with oculocutaneous albinism (OCA) so as to provide genetic counseling and prenatal diagnosis to them.@*METHODS@#Thirteen unrelated pedigrees with clinically diagnosed OCA were collected and classified based on the manifestation of skin and eyes. With informed consent obtained from the participants, peripheral blood samples were collected from the probands and their family members for the extraction of genomic DNA. Candidate variants were screened by targeted capture and next generation sequencing, and the results were validated by Sanger sequencing. Prenatal diagnosis was provided to the families upon their subsequent pregnancies.@*RESULTS@#Causative variants were detected in all probands, including 10 with compound heterozygotes or homozygotes for TYR gene variants and 3 with compound heterozygotes for OCA2 gene variants. Among these, two variants [TYR: c.650G>C (p.Arg217Pro) and OCA2: c.516-2A>T] were unreported previously. The pathogenicity of the novel TYR: c.650G>C (p.Arg217Pro) variant was verified through bioinformatic analysis and prediction of three dimensional structure of the protein. Prenatal diagnosis was provided to 6 fetuses with a high risk for OCA. Four fetuses were found to be carriers, one did not carry the variants of the proband, and one was affected with OCA.@*CONCLUSION@#Identification of the pathogenic variants in the 13 probands, including 2 novel ones, has expanded the mutational spectrum of OCA and enabled genetic counseling and prenatal diagnosis for the families.
Assuntos
Feminino , Humanos , Gravidez , Albinismo Oculocutâneo/genética , China , Testes Genéticos , Proteínas de Membrana Transportadoras/genética , Monofenol Mono-Oxigenase/genética , Mutação , Linhagem , Diagnóstico Pré-NatalRESUMO
In this study, the essential oil from lotus flower extract, including petals and stamens, was assessed with regard to its effects on melanogenesis in human melanocytes. The lotus flower essential oil was shown to stimulate melanin synthesis and tyrosinase activity in a dose-dependent manner. The lotus flower essential oil induced the expression of tyrosinase, microphthalmia-associated transcription factor M (MITF-M), and tyrosinase-related proten-2 (TRP-2) proteins, but not tyrosinase mRNA. Moreover, it increased the phosphorylation of ERK and cAMP response element binding protein (CREB). In order to verify the effective components of the lotus flower oil, its lipid composition was assessed. It was found to be comprised of palmitic acid methyl ester (22.66%), linoleic acid methyl ester (11.16%), palmitoleic acid methyl ester (7.55%) and linolenic acid methyl ester (5.16%). Among these components, palmitic acid methyl ester clearly induced melanogenesis as the result of increased tyrosinase expression, thereby indicating that it may play a role in the regulation of melanin content. Thus, our results indicate that lotus flower oil may prove useful in the development of gray hair prevention agents or tanning reagents.
Assuntos
Humanos , Western Blotting , Proliferação de Células , AMP Cíclico/metabolismo , Proteína de Ligação ao Elemento de Resposta ao AMP Cíclico/genética , Flores/química , Cromatografia Gasosa-Espectrometria de Massas , Oxirredutases Intramoleculares/genética , Lotus/química , Melaninas/biossíntese , Melanócitos/efeitos dos fármacos , Fator de Transcrição Associado à Microftalmia/genética , Monofenol Mono-Oxigenase/genética , Fosforilação , Óleos de Plantas/farmacologia , RNA Mensageiro/genética , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Pele/citologiaRESUMO
En nuestro centro el Tecnólogo en Medicina Nuclear interviene activamente en el desarrollo y evaluación de metodologías de Medicina Nuclear y de Biología Molecular vinculadas con la estrategia del ganglio centinela (GC). El objetivo del presente trabajo fue el de validar las técnicas nucleares y moleculares utilizadas mediante parámetros clínicos y pronósticos conocidos de la enfermedad. Incluimos prospectivamente 40 pacientes con melanoma clínicamente localizado, con un espesor medio de Breslow de 3.6 mm (rango: 0.5-15.0 mm). La edad media de los pacientes fue de 54.2 años (rango: 24-82 años), siendo 25 del sexo femenino. Se utilizó como radiofármaco al 99mTc nanocoloide de albúmina, realizando el estudio linfocentellográfico 16-18 horas antes de la cirugía, con una dosis total de 111-185 MBq. Se adquirieron imágenes secuenciales de 5 minutos en gama cámara, continuando hasta una hora post inyección de no visualizarse precozmente drenaje. Una vez localizado el(los) GC, realizamos vistas ortogonales a los efectos de localizar dichos ganglios en el espacio tridimensional. Los territorios ganglionares identificados mediante linfocentellografía fueron explorados quirúrgicamente mediante la ayuda de una sonda gama intraoperatoria. La radiactividad ganglionar y de los tejidos adyacentes fue medida in vivo y verificada ex vivo luego de la resección. Una relación de conteo ganglio/fondo mayor a 2 in vivo y mayor a 10 veces ex vivo fue considerada a los efectos de considerar un ganglio como GC. Los mismos fueron analizados mediante histopatología y en 14 pacientes se estudió además la expresión mediante RT-PCR, de los marcadores TIR, MART-1 y MIA, usando un protocolo de una fase con 35 ciclos de amplificación. Los experimentos fueron realizados en duplicado e incluyeron controles positivos y negativos. Los GC fueron identificados en 38/39 pacientes operables (97.4 por ciento), extirpándose una media de 1.3 ganglios. Se diagnosticaron metástasis ganglionares por his.
Assuntos
Masculino , Adulto , Humanos , Feminino , Pessoa de Meia-Idade , Melanoma , Melanoma/genética , Metástase Linfática , Metástase Linfática/genética , Linfonodos , Linfonodos/patologia , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Biópsia de Linfonodo Sentinela , Competência Clínica , Estudos Prospectivos , Biomarcadores Tumorais , Monofenol Mono-Oxigenase/genética , Proteínas de Neoplasias/genética , Valor Preditivo dos TestesRESUMO
CONTEXTO E OBJETIVO: Estudos recentes têm indicado que áreas de vitiligo contêm melanócitos inativos ou dormentes. A síntese de melanina está relacionada com a presença de tirosinase é indicadora de estado metabólico ativo. O escopo deste artigo é comparar repigmentação, distribuição epidérmica de melanócitos e detecção do RNAm de tirosinase através da reação de polimerase em cadeia por transcriptase reversa, em amostras de tecido de vitiligo, antes e após curetagem, seguido ou não por uma nova técnica de enxerto autólogo de pele. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Prospectivo, na Disciplina de Dermatologia da Faculdade de Medicina do ABC, Santo André. MÉTODOS: Duas áreas de vitiligo foram curetadas. Uma foi subseqüentemente enxertada com pele autóloga sacral normal, enquanto a outra não recebeu nenhum enxerto. As áreas curetadas foram examinadas após 30 dias, para avaliar o grau de repigmentação. A porcentagem de melanócitos e a presença de RNAm de tirosinase de pele normal e de pele de vitiligo (antes e após curetagem apenas e antes e após curetagem seguida de enxertia) foram comparadas. RESULTADOS: Repigmentação completa foi observada em todas as áreas enxertadas, enquanto as áreas de vitiligo apenas curetadas apresentaram repigmentação parcial. A porcentagem de melanócitos nas áreas enxertadas excederam as áreas de vitiligo não tratados (p = 0.01) e as áreas tratadas com curetagem simples (p = 0,015). RNAm de tirosinase foi negativo em 93.75 por cento das áreas não tratadas de vitiligo. Após tratamento (somente curetagem ou curetagem seguida de enxerto), todas as lesões tornaram-se positivas para RNAm de tirosinase. CONCLUSÃO: Melanócitos metabolicamente inativos ou dormentes estão provavelmente presentes dentro das áreas de vitiligo, e podem ser ativados por estímulos endógenos ou exógenos.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Criança , Adolescente , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Curetagem/métodos , Monofenol Mono-Oxigenase/análise , RNA Mensageiro/análise , Transplante de Pele/métodos , Vitiligo/cirurgia , Contagem de Células , Melanócitos , Monofenol Mono-Oxigenase/genética , Estudos Prospectivos , RNA Mensageiro/genética , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Resultado do Tratamento , Vitiligo/enzimologia , Vitiligo/patologiaRESUMO
Glycyrrhizin (GR), triterpenoid saponin composed of one glycyrrhetinic acid (GA) and two glucuronic acids, is a main constituent of the hydrophilic fraction of licorice (Glycyrrhiza glabra) extracts and is known to have a wide range of pharmacological actions. In this study, we investigated the mechanism of GR effect on melanogenesis in B16 murine melanoma cells. The cellular levels of tyrosinase mRNA, protein, enzyme activities and melanin contents were increased by GR in a dose dependent manner. Expression of tyrosinase-related protein-2 (TRP-2) mRNA was also increased by GR, however, no significant change was observed on TRP-1. No cytotoxicity was observed at the effective concentration range of GR. GA showed no effect on melanogenesis at the equivalent nontoxic concentrations, indicating that glycoside structure is important in the stimulatory effect of GR on melanogenesis. These results indicate that GR-induced stimulation of melanogenesis is likely to occur through the transcriptional activation.